Свойства термостабильных ДНК-полимераз в ПЦР


Название фермента Taq ДНК полимераза Taq SE ДНК полимераза Vent ДНК полимераза Pfu ДНК полимераза «Hot Start Taq» ДНК полимераза
SE каталожный номер E331, E332 E313, E314 E343, E344 E354 E351, E352
Полимеразная активность 5′→3′ + + + + +
Экзонуклеазная активность 5′→3′ + + - - +
Экзонуклеазная активность 3′→5′ - + + + -
Максимальная длина продукта (тыс.пар нуклеотидов) 6 15 5 3 6
3′ концы продукта - тупые или на один нуклеотид( dA ) выступающие смесь смесь >90% тупых >90% тупых смесь
Время элонгации (в минутах ) для продукта длиной 1 тыс.пар нуклеотидов 1 мин. 1 мин. 1.5 мин. 2 мин. 1 мин.
Концентрация праймеров, μM 0.1 0.2 0.4 0.5 0.1
Концентрация dNTP , μM 50 200 200 200 50
Температура реакционной смеси при приготовлении, °С 10 0 0 0 комнатная
Оптимальное количество фермента на 50 мкл реакционной смеси 1ед.акт 1ед.акт 0.1ед.акт 2.5ед.акт 1ед.акт
Краткая характеристика стандарт длинные продукты повышенная точность высокая точность высокая специфичность
(©) SE 2008