Сайт узнавания | CC↑NGG GGN↓CC |
Источник | Micrococcus species R9 |
Субстрат для определения активности | ДНК фага лямбда (dcm-) |
Единица активности | За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (dcm-) за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. |
Оптимальный SE-буфер | O (50 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 100 mM NaCl; 1 mM DTT.) |
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: | B | G | O | W | Y | Rose | 50 - 75 | 50 - 75 | 100 | 50 - 75 | 50 - 75 | 100 |
|
Оптимальная температура | 37oC |
Условия хранения | 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 100 ug/ml BSA; 7 mM2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Срок хранения фермента 1 год с даты проверки, указанной на фасовке |
Лигирование | После гидролиза 2-кратным избытком фермента <5% фрагментов ДНК сшиваются и могут быть повторно расщеплены. |
Неспецифический гидролиз | Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. |
Чувствительность к метилированию | Блокируется при перекрывании dcm-метилированием (CmCWGG): CCWGG. |
Инактивация 20 мин при | 80oC |
Примечание | С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер O. |
Литература: | Репин В.E., Андреева И.С., Килева E.В., Шевченко A.В., Абдурашитов M.A., Репин M.В., Дегтярев С.Х. Прикл. Биохим. Микробиол. 33: 284-286 (1997).
|