Информация по продукту: HspA I


Название
HspA IБлокируется 
5`-G(5mC)GC-3`/3`-CG(5mC)G-5` метилированием  Не блокируется 
5`-GCG(5mC)-3`/3`-(5mC)GCG-5` и 
5`-GCG(5mC)-3`/3`-CGCG-5` метилированием    
Кат. номераE069E070E069m
Фасовки, е.а.10005000500
Концентрация, е.а./мл200002000010000
Цена, руб1463.25852.8413

Сайт узнавания
GCGC
CGCG
ИсточникИз штамма E.coli несущего клонированный ген HspAI из Haemophilus species A1
Субстрат для определения активностиДНК фага лямбда
Единица активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Оптимальный SE-буферY (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.)
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
BGOWYRose
50 - 7550 - 7525 - 5025 - 50100100
Оптимальная температура
37oC
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 200 μg/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Срок хранения фермента 1 год с даты проверки, указанной на фасовке
ЛигированиеПосле гидролиза 20-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированиюБлокируется CG метилированием
5`-G(5mC)GC-3`/3`-CG(5mC)G-5`
Гидролизует полуметилированный по первому цитозину сайт
5`-G(5mC)GC-3`/3`-CGCG-5`
Не блокируется при метилировании
5`-GCG(5mC)-3`/3`-(5mC)GCG-5` и 5`-GCG(5mC)-3`/3`-CGCG-5`
Инактивация 20 мин при
80oC
ПримечаниеС ферментом поставляется 10 Х SE-буфер Y.
Литература:Речкунова Н.И., Приходько E.A., Шевченко A.В., Дегтярев С.Х. Неопубликованные данные(1994).
 В.А. Чернухин, М.А. Абдурашитов, В.Н. Томилов, Д.А. Гончар, С.Х. Дегтярев Сравнительный рестрикционный анализ хромосомной ДНК мыши in vitro и in silico // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю. А. Овчинникова, 2007, 3, №4, с. 19-27.
 В.А. Чернухин, М.А. Абдурашитов, В.Н. Томилов, Д.А. Гончар, С.Х. Дегтярев Сравнительный рестрикционный анализ хромосомной ДНК крысы in vitro и in silico // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю. А. Овчинникова, 2006, т. 2, №3, с. 39-46

Построить диаграмму расщепления участка ДНК по Вашему выбору с помощью данной эндонуклеазы рестрикции.
Введите в окно справа последовательность, состоящую из литер A, G, T, C и N длиной не менее 50 и не более 50 тысяч символов и нажмите кнопку Отправить

Теоретические электрофореграммы разделения фрагментов ДНК в 1%-ном агарозном геле 1хТБЕ для наиболее популярных плазмидных и вирусных ДНК:

Для просмотра длин фрагментов наведите курсор на дорожку. Вы можете скопировать данные, если необходимо, из всплывающего окна
Длины фрагментов на дорожке
M12345M

M - маркер, 1 - ДНК аденовируса-2, 2 - ДНК фага Лямбда, 3 - ДНК фага T7, 4 - pUC19, 5 - pBR322