Сайт узнавания | ↑(N)7GAAGNNNNNNTAC(N)12↑ ↓(N)12CTTCNNNNNNATG(N)7↓ |
Источник | Bacillus sphaericus |
Субстрат для определения активности | ДНК фага Т7 |
Единица активности | За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага T7 за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. |
Оптимальный SE-буфер | SE-буфер 2K (10 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 200 mM KCl; 1 mM DTT.) |
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: | B | G | O | W | Y | Rose | 0 - 10 | 0 - 10 | 25 - 50 | 50 - 75 | 10 - 25 | 40 |
|
Оптимальная температура | 37oC |
Условия хранения | 20 mM KH2PO4(pH 7.4); 100 mM KCl; 0,1 mM EDTA; 200 μg/ml BSA, 7 mM2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Срок хранения фермента 1 год с даты проверки, указанной на фасовке |
Лигирование | После гидролиза 2-кратным избытком фермента около 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 95% из них могут быть повторно расщеплены. |
Неспецифический гидролиз | Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 2 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. |
Чувствительность к метилированию | не проверялось |
Инактивация 20 мин при | 65oC |
Примечание | С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер 2K. |