| Сайт узнавания | CC↑TCGAGG
GGAGCT↓CC |
| Источник | Из Arthrobacter species 7М06. |
| Субстрат для определения активности | pUC19SE/DriI |
| Единица активности | За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг pUC19SE/DriI за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. |
| Оптимальный SE-буфер | SE-буфер AbsI (10 mM Tris-HCl (pH 9.0 при 25°C); 10 mM MgCl2; 50 mM KCl; 1 mM DTT.) |
| Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: | | B | G | O | W | Y | R | | 75 - 100 | 10 - 25 | 0 - 10 | 50 - 75 | 0 - 10 | 50 |
|
| Оптимальная температура | 37oC |
| Условия хранения | 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7mM 2-меркаптоэтанол;200 mkg/ml BSA; 0,05% Triton X-100; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Срок хранения фермента 1 год с даты проверки, указанной на фасовке |
| Лигирование | После гидролиза 2-кратным избытком фермента около 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. |
| Неспецифический гидролиз | Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 2 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. |
| Чувствительность к метилированию | не проверялось |
| Инактивация 20 мин при | 65oC |
| Примечание | Длительная инкубация может привести к появлению звездчатой активности.
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер AbsI |
| Литература: |  В.А. Чернухин, Ю.Г. Каширина, Ю.Э. Томилова, Д.А. Гончар, В.С. Дедков, Н.А. Михненкова, С.Х. Дегтярев. Новая сайт-специфическая эндонуклеаза AbsI из Arthrobacter species 7М06 узнает октануклеотидную палиндромную последовательность ДНК 5’-CC^TCGAGG-3’ // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю. А. Овчинникова, 2006, т. 2, №2, с. 29-34
|
Построить диаграмму расщепления участка ДНК по Вашему выбору с помощью данной эндонуклеазы рестрикции.
Введите в окно справа последовательность, состоящую из литер A, G, T, C и N длиной не менее 50 и не более 50 тысяч символов и нажмите кнопку Отправить | |
Теоретические электрофореграммы разделения фрагментов ДНК в 1%-ном агарозном геле 1хТБЕ для наиболее популярных плазмидных и вирусных ДНК:
Для просмотра длин фрагментов наведите курсор на дорожку. Вы можете скопировать данные, если необходимо, из всплывающего окнаДлины фрагментов на дорожке |
M - маркер, 1 - ДНК аденовируса-2, 2 - ДНК фага Лямбда, 3 - ДНК фага T7, 4 - pUC19, 5 - pBR322
|
