| Сайт узнавания | GCC↑GGC
CGG↓CCG |
| Источник | Kocurea rosea56 |
| Субстрат для определения активности | плазмидная ДНК pSXH7 (13092 п.н.).
pSXH7 получена путем лигирования вектора
pUC19/BamHIи BstX2I-фрагмент а геномной
ДНК бактерии Sporosarcina species9 (GC-состав
70-76%). Содержит 42 сайта узнавания KroNI |
| Единица активности | За единицу
активности принимается количество
фермента, способное гидролизовать
1 мкг ДНК pSXH7в 50 мкл реакционной
смеси в SE-буфере B при 37°С за 1 час. |
| Оптимальный SE-буфер | B (10 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 1 mM DTT.) |
| Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: | | B | G | O | W | Y | Rose | | 100 | 75 - 100 | 10 - 25 | 25 - 50 | 75 - 100 | 50 |
|
| Оптимальная температура | 37oC |
| Условия хранения | 20mM Tris-HCl (pH 7.5), 200 mM NaCl,
0.1 mM EDTA, 100 мкг/мл BSA,
7 mM 2-меркаптоэт анол, 50% глицерин
Срок хранения фермента 2 года |
| Лигирование | После гидролиза 3-кратным избытком
фермента около 90% фрагментов ДНК
сшиваются ДНК-лиг азой и могут быть
повторно расщеплены. |
| Неспецифический гидролиз | Картина специфического гидролиза
не изменяется при обработке 1 мкг ДНК
4ед фермента в течение 16 часов при 37°С |
| Чувствительность к метилированию | Блокируется CG метилированием
5'-GC(5mC)GGC-3'/3'-CGG(5mC)CG-5'. |
| Инактивация 20 мин при | 80oC |
| Примечание | После инкубации 2 ед фермент а в течение
3 часов неспецифического гидролиза одно-
и двуцепочечного олигонуклеотидов
не наблюдается.
Для эффективного гидролиза ДНК ферментом требуется два или больше сайтов узнавания.
|
Построить диаграмму расщепления участка ДНК по Вашему выбору с помощью данной эндонуклеазы рестрикции.
Введите в окно справа последовательность, состоящую из литер A, G, T, C и N длиной не менее 50 и не более 50 тысяч символов и нажмите кнопку Отправить | |
Теоретические электрофореграммы разделения фрагментов ДНК в 1%-ном агарозном геле 1хТБЕ для наиболее популярных плазмидных и вирусных ДНК:
Для просмотра длин фрагментов наведите курсор на дорожку. Вы можете скопировать данные, если необходимо, из всплывающего окнаДлины фрагментов на дорожке |
M - маркер, 1 - ДНК аденовируса-2, 2 - ДНК фага Лямбда, 3 - ДНК фага T7, 4 - pUC19, 5 - pBR322
|