Сайт узнавания | C↑AATTG GTTAA↓C |
Источник | Из штамма E.coli несущего клонированный ген Mfe I из Mycoplasma fermentans. |
Субстрат для определения активности | ДНК фага лямбда |
Единица активности | За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. |
Реакционный буфер | SE-буфер B, (10 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 1 mM DTT.) |
Оптимальная температура | 37oC |
Условия хранения | 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Срок хранения фермента 1 год с даты проверки, указанной на фасовке |
Лигирование | После гидролиза 20-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. |
Неспецифический гидролиз | Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК
20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. |
Инактивация 20 мин | Нет |
Примечание | Большой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности.
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер B, BSA. |
Литература: | Halden, N.F., Wolf, J.B., Cross, S.L., Leonard, W.J. Clin. Res. 36: 404a (1988).
|