| Сайт узнавания | A↑CTAGT
TGATC↓A |
| Источник | Alteromonas haloplanktis SP |
| Субстрат для определения активности | ДНК фага Т7 |
| Единица активности | За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага T7 за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. |
| Реакционный буфер | SE-буфер B, (10 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 1 mM DTT.) |
| Оптимальная температура | 37oC |
| Условия хранения | 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Срок хранения фермента 1 год с даты проверки, указанной на фасовке |
| Лигирование | После гидролиза 20-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК фага T7 сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. |
| Неспецифический гидролиз | Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 37LС. |
| Инактивация 20 мин | Нет |
| Примечание | Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл.
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер B, BSA (кроме E173T и E174T)
Для фасовок Turbo (E173T и E174T) дополнительно прикладывается буфер ROSE. |
| Литература: | Мякишева T.В., Беличенко O.A., Попиченко Д.В., Дедков В.С., Дегтярев С.Х. Неопубликованные данные (2000).
|