| Сайт узнавания | G↑GTACC
CCATG↓G |
| Источник | Acinetobacter calcoaceticus 65 |
| Субстрат для определения активности | ДНК фага лямбда (dcm-) |
| Единица активности | За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда(dcm-) за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. |
| Реакционный буфер | SE-буфер W, (10 mM Tris-HCl (pH 8.5 при 25°C); 10 mM MgCl2; 100 mM NaCl; 1 mM DTT.) |
| Оптимальная температура | 37oC |
| Условия хранения | 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 200ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Срок хранения фермента 1 год с даты проверки, указанной на фасовке |
| Лигирование | После гидролиза 10-кратным избытком фермента около 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. |
| Неспецифический гидролиз | Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37LС. |
| Инактивация 20 мин при | 65oC |
| Примечание | Большой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности.
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер W.
Для фасовок Turbo (E003T и E004T) дополнительно прикладывается буфер ROSE. |
| Литература: | Приходько Г.Г., Речкунова Н.И., Репин В.E., Дегтярев С.Х. Сиб. Биол. Ж. 1: 59-60 (1991).
|
