Сайт узнавания | CCCGC(N)4↑ GGGCG(N)6↓ |
Источник | Из штамма E.coli несущего клонированный ген Fau I из Flavobacterium aquatili |
Субстрат для определения активности | ДНК фага лямбда |
Единица активности | За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 55°С в 50 мкл реакционной смеси. |
Оптимальный SE-буфер | B (10 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 1 mM DTT.) |
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: | B | G | O | W | Y | Rose | 100 | 25 - 50 | 0 - 10 | 0 - 10 | 50 - 75 | 50 |
|
Оптимальная температура | 55oC |
Условия хранения | 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Срок хранения фермента 1 год с даты проверки, указанной на фасовке |
Лигирование | После гидролиза 2-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 95% из них могут быть повторно расщеплены. |
Неспецифический гидролиз | Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК
4 ед фермента в течение 16 часов при 55°С |
Чувствительность к метилированию | Блокируется CG метилированием |
Инактивация 20 мин при | 65oC |
Примечание | С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер B. |
Литература: | Дегтярев С.Х., Колыхалов A.A., Речкунова Н.И., Дедков В.С. Биоорг. Хим. 15: 130-132 (1989).
Абдурашитов М.А., Охапкина С.С., Нетесова Н.А., Голикова Л.Н., Гончар Д. А., Дегтярев С.Х. Уникальная система рестрикции-модификации FauI: клонирование и сравнительный анализ структуры белков.// Молекулярная биология, т. 37, № 4, с. 619-624 (2003).
|
Построить диаграмму расщепления участка ДНК по Вашему выбору с помощью данной эндонуклеазы рестрикции. Введите в окно справа последовательность, состоящую из литер A, G, T, C и N длиной не менее 50 и не более 50 тысяч символов и нажмите кнопку Отправить | |
Теоретические электрофореграммы разделения фрагментов ДНК в 1%-ном агарозном геле 1хТБЕ для наиболее популярных плазмидных и вирусных ДНК:
Для просмотра длин фрагментов наведите курсор на дорожку. Вы можете скопировать данные, если необходимо, из всплывающего окнаДлины фрагментов на дорожке | M - маркер, 1 - ДНК аденовируса-2, 2 - ДНК фага Лямбда, 3 - ДНК фага T7, 4 - pUC19, 5 - pBR322
|