Информация по продукту: BslF I


Название
BslF I
Кат. номераE479E480
Фасовки, е.а.100500
Концентрация, е.а./мл10001000
Цена, руб306812272

Сайт узнавания
GGGAC(N)10
CCCTG(N)14
ИсточникBacillus stearothermophilus Fl
Субстрат для определения активностиДНК фага лямбда
Единица активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Оптимальный SE-буферY (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.) + BSA
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
BGOWYRose
25 - 5025 - 5010 - 2525 - 5010050
Оптимальная температура
37oC
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 250 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Срок хранения фермента 1 год с даты проверки, указанной на фасовке
ЛигированиеПосле гидролиза 3-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 95% из них могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 1 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированиюне проверялось
Инактивация 20 мин при
80oC
ПримечаниеВысокая концентрация фермента в реакционной смеси приводит к появлению звездчатой активности.
Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл
BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
В присутствии SAM фермент проявляет ДНК-метилтрансферазную активность, максимальную при 48°С. При наличии в в реакционной смеси 10мМ MgCl2 рестриктазная и метилтрансферазная активности проявляются одновременно и ДНК гидролизуется специфически и полностью. При отсутствии MgCl2 ДНК только метилируется и впоследствии устойчива к гидролизу BslFI.
Фермент также расщепляет ДНК в положении 11/15 от сайта узнавания.
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер Y, BSA
Литература:Надеев А.Н., Каширина Ю.Г., Наякшина Т.Н., Дедков В.С., Мезенцева Н.В., Томилова Ю.Э., Дегтярев С.Х. Неопубликованные данные (2004).

Построить диаграмму расщепления участка ДНК по Вашему выбору с помощью данной эндонуклеазы рестрикции.
Введите в окно справа последовательность, состоящую из литер A, G, T, C и N длиной не менее 50 и не более 50 тысяч символов и нажмите кнопку Отправить

Теоретические электрофореграммы разделения фрагментов ДНК в 1%-ном агарозном геле 1хТБЕ для наиболее популярных плазмидных и вирусных ДНК:

Для просмотра длин фрагментов наведите курсор на дорожку. Вы можете скопировать данные, если необходимо, из всплывающего окна
Длины фрагментов на дорожке
M12345M

M - маркер, 1 - ДНК аденовируса-2, 2 - ДНК фага Лямбда, 3 - ДНК фага T7, 4 - pUC19, 5 - pBR322