| Информация по продукту: EcoR I |
| Название | | EcoR I | |
| | Кат. номера | E057 | E058 | E057X | E058X | | Фасовки, е.а. | 5000 | 25000 | 5000 | 25000 | | Концентрация, е.а./мл | 20000 | 20000 | 50000 | 50000 |
| Цена, руб (без налогов) | 580 | 2320 | 580 | 2320 | | Добавить в корзину |  |  |  |  |
| Сайт узнавания | G↑AATTC CTTAA↓G | | Источник | Из штамма E.coli несущего клонированный ген EcoR I из Escherichia coli | | Субстрат для определения активности | ДНК фага лямбда | | Единица активности | За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. | | Оптимальный SE-буфер | SE-буфер EcoRI (100 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 50 mM NaCl; 1 mM DTT.) + BSA | | Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: | | B | G | O | W | Y | R | | 50 - 75 | 75 - 100 | 75 - 100 | 75 - 100 | 50 - 75 | 50 |
| | Оптимальная температура | 37oC | | Условия хранения | 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 200 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Срок хранения фермента 1 год с даты проверки, указанной на фасовке | | Лигирование | После гидролиза 40-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. | | Неспецифический гидролиз | Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК
40 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. | | Чувствительность к метилированию | не проверялось | | Инактивация 20 мин при | 65oC | | Примечание | При большом избытке фермента, при использовании неоптимального буфера возможно появление звездчатой активности.
Длительная инкубация c BSA не рекомендуется из-за появления звездчатой активности.
Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл.
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер EcoRI, BSA. | | Литература: | Albertsen, H.M., Le Paslier, D., Abderrahim, H., Dausset, J., Cann, H., Cohen, D. Nucleiv Acids Res. 17: 808 (1989).
В.А. Чернухин, М.А. Абдурашитов, В.Н. Томилов, Д.А. Гончар, С.Х. Дегтярев Сравнительный рестрикционный анализ хромосомной ДНК мыши in vitro и in silico // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю. А. Овчинникова, 2007, 3, №4, с. 19-27.
В.А. Чернухин, М.А. Абдурашитов, В.Н. Томилов, Д.А. Гончар, С.Х. Дегтярев Сравнительный рестрикционный анализ хромосомной ДНК крысы in vitro и in silico // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю. А. Овчинникова, 2006, т. 2, №3, с. 39-46
| Построить диаграмму расщепления участка ДНК по Вашему выбору с помощью данной эндонуклеазы рестрикции. Введите в окно справа последовательность, состоящую из литер A, G, T, C и N длиной не менее 50 и не более 50 тысяч символов и нажмите кнопку Отправить | | Теоретические электрофореграммы разделения фрагментов ДНК в 1%-ном агарозном геле 1хТБЕ для наиболее популярных плазмидных и вирусных ДНК:
Для просмотра длин фрагментов наведите курсор на дорожку. Вы можете скопировать данные, если необходимо, из всплывающего окнаДлины фрагментов на дорожке | M - маркер, 1 - ДНК аденовируса-2, 2 - ДНК фага Лямбда, 3 - ДНК фага T7, 4 - pUC19, 5 - pBR322
|
|