| Сайт узнавания | GACNNNN↑NNGTC
CTGNN↓NNNNCAG |
| Источник | Из Deinococcus species D2 |
| Субстрат для определения активности | ДНК фага лямбда |
| Единица активности | За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. |
| Оптимальный SE-буфер | Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.) + BSA |
| Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: | | B | G | O | W | Y | Rose | | 75 - 100 | 75 - 100 | 25 - 50 | 50 - 75 | 100 | 30 |
|
| Оптимальная температура | 37oC |
| Условия хранения | 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Срок хранения фермента 1 год с даты проверки, указанной на фасовке |
| Лигирование | После гидролиза 5-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены |
| Неспецифический гидролиз | Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 30 ед фермента в течение 16 часов при 37°С |
| Чувствительность к метилированию | не проверялось |
| Инактивация 20 мин при | 80oC |
| Примечание | Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл.
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер Y, BSA.
|
| Литература: | Абдурашитов M.A., Килева E.В., Дедков В.С., Дегтярев С.Х. Неопубликованные данные (1996).
|