| Сайт узнавания | CTCTTCN↑
GAGAAG(N)4↓ |
| Источник | Bacillus stearothermophilus 6 |
| Субстрат для определения активности | ДНК фага лямбда |
| Единица активности | За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 65°С в 50 мкл реакционной смеси. |
| Оптимальный SE-буфер | Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.) + BSA |
| Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: | | B | G | O | W | Y | Rose | | 75 - 100 | 75 - 100 | 50 - 75 | 75 - 100 | 100 | 100 |
|
| Оптимальная температура | 65oC |
| Условия хранения | 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°C. Для периода более 30 дней рекомендуется хранить при -70°C.
Срок хранения фермента 1 год с даты проверки, указанной на фасовке |
| Лигирование | После гидролиза 2-кратным избытком фермента 80% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и около 80% из них могут быть повторно расщеплены. |
| Неспецифический гидролиз | Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 65°C. |
| Чувствительность к метилированию | не проверялось |
| Инактивация 20 мин при | 80oC |
| Примечание | Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер Y, BSA |
| Литература: | Abdurashitov, M.A., Dedkov, V.S., Kileva, E.V., Popichenko, D.V., Degtyarev, S.K.
Unpublished observations.(2001)
 В.А. Чернухин, М.А. Абдурашитов, В.Н. Томилов, Д.А. Гончар, С.Х. Дегтярев Сравнительный рестрикционный анализ хромосомной ДНК крысы in vitro и in silico // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю. А. Овчинникова, 2006, т. 2, №3, с. 39-46
|
