| Сайт узнавания | GGTCTCN↑ CCAGAG(N)5↓ |
| Источник | Bacillus stearothermophilus 31 |
| Субстрат для определения активности | ДНК фага T7 |
| Единица активности | За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага T7 за 1 час при 55°С в 50 мкл реакционной смеси. |
| Оптимальный SE-буфер | O (50 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 100 mM NaCl; 1 mM DTT.) + BSA |
| Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: | | B | G | O | W | Y | R | | 25 - 50 | 75 - 100 | 100 | 75 - 100 | 25 - 50 | 40 |
|
| Оптимальная температура | 55oC |
| Условия хранения | 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 100 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Срок хранения фермента 1 год с даты проверки, указанной на фасовке |
| Лигирование | После гидролиза 5-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и около 80% из них могут быть повторно расщеплены. |
| Неспецифический гидролиз | Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 55°С. |
| Чувствительность к метилированию | Не блокируется метилированием GGTCTmC. |
| Инактивация 20 мин при | 80oC |
| Примечание | Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер O, BSA
|
| Литература: | Шинкаренко Н.M., Лебедева Н.A., Дедков В.С., Абдурашитов M.A., Дегтярев С.Х. Неопубликованные данные (1999).
|