| Сайт узнавания | CC↑TNAGG
GGANT↓CC |
| Источник | Bacillus species 21 |
| Субстрат для определения активности | ДНК фага лямбда (HindIII-digest) |
| Единица активности | За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (HindIII-digest) за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. |
| Оптимальный SE-буфер | Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.) |
| Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: | | B | G | O | W | Y | Rose | | 50 - 75 | 50 - 75 | 10 - 25 | 25 - 50 | 100 | 40 |
|
| Оптимальная температура | 37oC |
| Условия хранения | 10 mM KH2PO4(pH 7.4); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Срок хранения фермента 1 год с даты проверки, указанной на фасовке |
| Лигирование | После гидролиза 2-кратным избытком фермента около 50% фрагментов ДНК сшиваются высокоактивной ДНК-лигазой в присутствии 10%ПЭГ и более 90% из них могут быть повторно расщеплены. |
| Неспецифический гидролиз | Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 30 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. |
| Чувствительность к метилированию | не проверялось |
| Инактивация 20 мин при | 80oC |
| Примечание | С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер Y |
| Литература: | Дегтярев С.Х., Речкунова Н.И., Репин В.E., Колыхалов A.A., Нетесов С.В. Изв. Сиб. Отд. Акад. Наук СССР 1: 138-139 (1990).
 В.А. Чернухин, М.А. Абдурашитов, В.Н. Томилов, Д.А. Гончар, С.Х. Дегтярев Сравнительный рестрикционный анализ хромосомной ДНК крысы in vitro и in silico // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю. А. Овчинникова, 2006, т. 2, №3, с. 39-46
|
