| Сайт узнавания | CCNNNNN↑NNGG
GGNN↓NNNNNCC |
| Источник | Bacillus schlegelii 4 |
| Субстрат для определения активности | ДНК фага лямбда |
| Единица активности | За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 55°С в 50 мкл реакционной смеси. |
| Оптимальный SE-буфер | W (10 mM Tris-HCl (pH 8.5 при 25°C); 10 mM MgCl2; 100 mM NaCl; 1 mM DTT.) + BSA |
| Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: | | B | G | O | W | Y | Rose | | 75 - 100 | 75 - 100 | 50 - 75 | 100 | 25 - 50 | 90 |
|
| Оптимальная температура | 55oC |
| Условия хранения | 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°C.
Срок хранения фермента 1 год с даты проверки, указанной на фасовке |
| Лигирование | После гидролиза 10-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. |
| Неспецифический гидролиз | Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 55°C. |
| Чувствительность к метилированию | не проверялось |
| Инактивация 20 мин при | 80oC |
| Примечание | Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер W, BSA
|
| Литература: | Репин В.E., Серов Г.Д., Пучкова Л.И., Терещенко T.A., Лебедев Л.Р., Чижиков В.E. Биоорг. Хим. 19: 583-585 (1993).
|