Информация по продукту: Эндонуклеаза I


Название
Эндонуклеаза I
Кат. номераE323E324
Фасовки, е.а.400020000
Концентрация, е.а./мл10000-5000010000-50000
Цена, руб23019204

ИсточникProteus vulgaris 84
ОписаниеРасщепляет нативную и денатурированную ДНК и РНК до олигонуклеотидов длиной 3-5 нуклеотидных остатков с 5`-фосфатом на конце
Единица активностиЗа одну единицу активности принимали количество фермента, необходимое для расщепления 1 мкг ДНК фага лямбда за 30 минут при 37°С
Реакционный буферSE буфер Эндонуклеаза I, (20 mМ Глицин-NaOH (pH 9.5 при 25°C); 25 mM MgCl2; 100mM NaCl; 1mM 2-меркаптоэтанол)
Оптимальная температура
37oC
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.4); 250 mM NaCl; 0,2 mM EDTA; 100 μg/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Срок хранения фермента 1 год с даты проверки, указанной на фасовке
Контроль качестваИнкубация 10ед. Эндонуклеазы I с 20нг одно или двуцепочечного синтетического олигонуклеотида в 10 мкл реакционной смеси содержащей SE буфер для Эндонуклеазы I в течение 3 часов при 37° C не выявила примесей фосфатаз. Наличие примесей определяется по потере радиоактивности исходным 5` 32P меченным олигонуклеотидом или 5` 32P меченными продуктами гидролиза олигонуклеотида Эндонуклеазой I при разделении в денатурирующем полиакриламидном геле и последующей радиоавтографии.
Литература: Ю.П. Зернов, О.М. Хощенко, B.C. Дедков, С.Х. Дегтярев Выделение и характеристика эндонуклеазы I из Proteus vulgaris 84 // Биотехнология, 2002, № 1, С 15-20

Дорожки:
1. двуцепочечный синтетический олигонуклеотид 5`p*GTGCATGGCGCCTATGCG3`/ 3`CACGTACCGCGGATACGC5`
2. двуцепочечный синтетический олигонуклеотид 5`p*GTGCATGGCGCCTATGCG3`/ 3`CACGTACCGCGGATACGC5` гидролизованный Эндонуклеазой I
3. одноцепочечный синтетический олигонуклеотид 5`p*GTGCATGGCGCCTATGCG3` гидролизованный Эндонуклеазой I
4. двуцепочечный синтетический олигонуклеотид 5`p*GTGCATGGCGCCTATGCG3`/ 3`CACGTACCGCGGATACGC5` гидролизованный эндонуклеазой рестрикции Fai I (сайт узнавания YA^TR)
5. одноцепочечный синтетический олигонуклеотид 5`p*GTGCATGGCGCCTATGCG3`
6. одноцепочечный синтетический олигонуклеотид 5`p*GTGCATGGCGCCTATGCG3`обработанный щелочной фосфатазой
<*> указана 32P меченная цепь
20% ПААГ с 7М мочевиной