Информация по продукту: Fal I


Название
Fal I
Кат. номераE153E154
Фасовки, е.а.100500
Концентрация, е.а./мл1000-30001000-3000
Цена, руб306812272

Сайт узнавания
(N)8AAGNNNNNCTT(N)13
(N)13TTCNNNNNGAA(N)8
ИсточникFlavobacterium aquatile Ob10
Субстрат для определения активностиДНК фага лямбда
Единица активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Оптимальный SE-буферW (10 mM Tris-HCl (pH 8.5 при 25°C); 10 mM MgCl2; 100 mM NaCl; 1 mM DTT.) + SAM
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
BGOWYRose
0 - 1025 - 5075 - 10010050 - 7570
Оптимальная температура
37oC
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 250 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Срок хранения фермента 1 год с даты проверки, указанной на фасовке
ЛигированиеПосле гидролиза 3-кратным избытком фермента 20% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 80% из них могут быть повторно расщеплены. В присутствии 10% ПЭГ сшивка проходит лучше
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 37°С
Чувствительность к метилированиюне проверялось
Инактивация 20 мин при
65oC
ПримечаниеБольшой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности.
Для достижения 100% активности SAM следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 0.01 mM.
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер W, SAM.
Литература:Дедков В.С., Синичкина С.А., Абдурашитов M.A., Попиченко Д.В., Дегтярев С.Х. Неопубликованные данные (2001).
 В. С. Дедков, С. А. Синичкина, М. А. Абдурашитов, Д. В. Попиченко, С. X. Дегтярёв Эндонуклеазы рестрикции FalI и FalII из Flavobacterium aquatile Ob10 узнают 5'-(8/13)AAG(N)5CTT(13/8)-3' и 5'-CG↓CG-3', соответственно // Биотехнология, 2003, № 6, c 24-29