Информация по продукту: BstKT I


Название
BstKT IБлокируется G(6mA)TC метилированием  Не блокируется GAT(5mC) метилированием  
Кат. номераE151E152
Фасовки, е.а.2001000
Концентрация, е.а./мл2000-50002000-5000
Цена, руб383515340

Сайт узнавания
GATC
CTAG
ИсточникBacillus stearothermophilus KT
Субстрат для определения активностиДНК фага лямбда (dam-)
Единица активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (dam-) за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Оптимальный SE-буферW (10 mM Tris-HCl (pH 8.5 при 25°C); 10 mM MgCl2; 100 mM NaCl; 1 mM DTT.)
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
BGOWYRose
25 - 5050 - 7575 - 10010050 - 75100
Оптимальная температура
37oC
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 100 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Срок хранения фермента 1 год с даты проверки, указанной на фасовке
ЛигированиеПосле гидролиза 5-кратным избытком фермента около 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 37°С
Чувствительность к метилированиюБлокируется dam-метилированием (GmATC):
5`-G(6mA)TC-3`/3`-CT(6mA)G-5`
Не блокируется CG метилированием.
Гидролизует полуметилированный по аденину сайт:
5`-G(6mA)TC-3`/3`-CTAG-5`
Инактивация 20 мин при
65oC
ПримечаниеС ферментом поставляется 10 Х SE-буфер W
Литература: А.Н. Надеев, В.А.Чернухин, О.О. Севастьянова, Ю.Э. Томилова, Н.М. Шинкаренко, А.А. Евдокимов, С.Х. Дегтярев BstKTI – новый dam-чувствительный неошизомер эндонуклеазы рестрикции MboI, способный гидролизовать полуметилированный субстрат // Биотехнология, 2006, №2, с. 5-10

Построить диаграмму расщепления участка ДНК по Вашему выбору с помощью данной эндонуклеазы рестрикции.
Введите в окно справа последовательность, состоящую из литер A, G, T, C и N длиной не менее 50 и не более 50 тысяч символов и нажмите кнопку Отправить

Теоретические электрофореграммы разделения фрагментов ДНК в 1%-ном агарозном геле 1хТБЕ для наиболее популярных плазмидных и вирусных ДНК:

Для просмотра длин фрагментов наведите курсор на дорожку. Вы можете скопировать данные, если необходимо, из всплывающего окна
Длины фрагментов на дорожке
M12345M

M - маркер, 1 - ДНК аденовируса-2, 2 - ДНК фага Лямбда, 3 - ДНК фага T7, 4 - pUC19, 5 - pBR322