Информация по продукту: Acu I


Название
Acu I
Кат. номераE451E452
Фасовки, е.а.50250
Концентрация, е.а./мл10001000
Цена, руб1191.84767.2

Сайт узнавания
CTGAAG(N)16
GACTTC(N)14
ИсточникИз штамма E.coli несущего клонированный ген Acu I из Acinetobacter calcoaceticus SRW4
Субстрат для определения активностиДНК фага лямбда
Единица активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Оптимальный SE-буферY (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.) + BSA + SAM
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
BGOWYRose
25 - 5050 - 7550 - 7575 - 10010050
Оптимальная температура
37oC
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Срок хранения фермента 1 год с даты проверки, указанной на фасовке
ЛигированиеПосле гидролиза 2-кратным избытком фермента около 80% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 80% из них могут быть повторно расщеплены
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 2 ед фермента в течение 16 часов при 37°С
Чувствительность к метилированиюне проверялось
Инактивация 20 мин при
65oC
ПримечаниеБольшой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности.
Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл и SAM до концентрации 10мкМ. Допустимо использовать SAM в конечной концентрации 10-40 мкМ, т.е. 32 мМ штоковый раствор необходимо разбавлять в 3200-800 раз. Если объем реакционной смеси минимальный, например 10-20 мкл, то штоковый раствор SAM можно предварительно разбавить 5 мМ раствором H2SO4 или водой, хранить при -20°C.
При длительной инкубации BSA использовать не рекомендуется.
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер Y, BSA, SAM
Литература:Дегтярев С.Х., Килева E.В., Дедков В.С. Неопубликованные данные (2001).

Построить диаграмму расщепления участка ДНК по Вашему выбору с помощью данной эндонуклеазы рестрикции.
Введите в окно справа последовательность, состоящую из литер A, G, T, C и N длиной не менее 50 и не более 50 тысяч символов и нажмите кнопку Отправить

Теоретические электрофореграммы разделения фрагментов ДНК в 1%-ном агарозном геле 1хТБЕ для наиболее популярных плазмидных и вирусных ДНК:

Для просмотра длин фрагментов наведите курсор на дорожку. Вы можете скопировать данные, если необходимо, из всплывающего окна
Длины фрагментов на дорожке
M12345M

M - маркер, 1 - ДНК аденовируса-2, 2 - ДНК фага Лямбда, 3 - ДНК фага T7, 4 - pUC19, 5 - pBR322