Информация по продукту: Dra III


Название
Dra III
Кат. номераE309E310
Фасовки, е.а.5002500
Концентрация, е.а./мл50005000
Цена, руб2112.28448.8

Сайт узнавания
CACNNNGTG
GTGNNNCAC
ИсточникИз штамма E.coli несущего клонированный ген DraIII из Deinococcus radiophilus
Субстрат для определения активностиДНК фага лямбда
Единица активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Оптимальный SE-буфер2K (10 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 200 mM KCl; 1 mM DTT.) + BSA
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
BGOWYRose
25 - 5050 - 7575 - 10075 - 10050 - 75100
Оптимальная температура
37oC
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 300 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Срок хранения фермента 1 год с даты проверки, указанной на фасовке
ЛигированиеПосле гидролиза 10-кратным избытком фермента 70% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. В присутствии 10% ПЭГ сшивка проходит лучше
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированиюне проверялось
Инактивация 20 мин при
65oC
ПримечаниеБольшой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности.
Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл.
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер 2K, BSA.
Литература:de Wit, C.M., Dekker, B.M.M., Neele, A.C., de Waard, A., FEBS Lett. 180: 219-223 (1985) Grosskopf, R., Wolf, W., Kessler, C., Nucleic Acid res. 13: 1517-1528 (1985)