Информация по продукту: Psr I


Название
Psr I
Кат. номераE131E132
Фасовки, е.а.100500
Концентрация, е.а./мл1000-30001000-3000
Цена, руб422516900

Сайт узнавания
(N)7GAACNNNNNNTAC(N)12
(N)12CTTGNNNNNNATG(N)7
ИсточникPseudomonas stutzeri N2
Субстрат для определения активностиДНК фага Т7
Единица активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага T7 за 1 час при 30°С в 50 мкл реакционной смеси.
Оптимальный SE-буферY (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.) + BSA
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
BGOWYRose
10 - 2510 - 250 - 100 - 1010030
Оптимальная температура
30oC
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0,1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA, 7 mM2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Срок хранения фермента 1 год с даты проверки, указанной на фасовке
ЛигированиеПосле гидролиза 2-кратным избытком фермента более 70% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 80% из них могут быть повторно расщеплены. В присутствии 10% ПЭГ сшивка проходит лучше.
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 2 ед фермента в течение 16 часов при 30°С.
Чувствительность к метилированиюне проверялось
Инактивация 20 мин при
65oC
ПримечаниеПри 37°С активность 20% от максимальной
Большой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности.
Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл.
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер Y, BSA.
Литература:Дедков В.С., Килева E.В., Абдурашитов M.A., Гончар Д.A., Попиченко Д.В., Дегтярев С.Х. Неопубликованные данные (2001).