| Сайт узнавания | GACNN↑NNGTC
CTGNN↓NNCAG |
| Источник | Bacillus stearothermophillus PA |
| Субстрат для определения активности | ДНК фага лямбда |
| Единица активности | За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 65°С в 50 мкл реакционной смеси. |
| Оптимальный SE-буфер | Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.) |
| Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: | | B | G | O | W | Y | R | | 50 - 75 | 25 - 50 | 50 - 75 | 50 - 75 | 100 | 100 |
|
| Оптимальная температура | 65oC |
| Условия хранения | 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Срок хранения фермента 1 год с даты проверки, указанной на фасовке |
| Лигирование | После гидролиза 5-кратным избытком фермента менее 5% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой |
| Неспецифический гидролиз | Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 25°С |
| Чувствительность к метилированию | не проверялось |
| Инактивация 20 мин | Нет |
| Примечание | Большой избыток фермента или инкубация при 65°С более 16 часов приводит к появлению звездчатой активности.
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер Y. |
| Литература: | Томилова Ю.Э., Дедков В.С., Килева E.В., Попиченко Д.В., Дегтярев С.Х. Неопубликованные данные (2000).
|
