Сайт узнавания | T↑CTAGA AGATC↓T |
Источник | Из штамма E.coli несущего клонированный ген XbaI из Xanthomonas badrii |
Субстрат для определения активности | ДНК фага лямбда (dam-/HindIII-digest) |
Единица активности | За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (dam-/ HindIII-digest) за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. |
Оптимальный SE-буфер | O (50 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 100 mM NaCl; 1 mM DTT.) + BSA |
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: | B | G | O | W | Y | Rose | 75 - 100 | 75 - 100 | 100 | 50 - 75 | 75 - 100 | 25 |
|
Оптимальная температура | 37oC |
Условия хранения | 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 1 mM DTT; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Срок хранения фермента 1 год с даты проверки, указанной на фасовке |
Лигирование | После гидролиза 20-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. |
Неспецифический гидролиз | Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. |
Чувствительность к метилированию | Блокируется при перекрывании dam-метилированием (GmATC): TCTAGATC. |
Инактивация 20 мин при | 65oC |
Примечание | Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл.
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер O, BSA (кроме E141m, E141T и E142T).
Для фасовок Turbo (E141T и E142T) прикладывается только буфер ROSE.
|
Литература: | Zain, B,S., Roberts, R.J. J. Mol. Biol. 115: 249-255 (1977).
Абдурашитов М. А, Чернухин В. А., Томилов В. Н., Гончар Д. А., Дегтярев С. Х. Рестрикционный анализ ДНК человека – новые возможности в ДНК-диагностике // Медицинская генетика, Т.6, № 8, с 29-36, 2007
|
Построить диаграмму расщепления участка ДНК по Вашему выбору с помощью данной эндонуклеазы рестрикции. Введите в окно справа последовательность, состоящую из литер A, G, T, C и N длиной не менее 50 и не более 50 тысяч символов и нажмите кнопку Отправить | |
Теоретические электрофореграммы разделения фрагментов ДНК в 1%-ном агарозном геле 1хТБЕ для наиболее популярных плазмидных и вирусных ДНК:
Для просмотра длин фрагментов наведите курсор на дорожку. Вы можете скопировать данные, если необходимо, из всплывающего окнаДлины фрагментов на дорожке | |