Информация по продукту: Vsp I


Название
Vsp IБлокируется ATTA(6mA)T метилированием    
Кат. номераE139E140E139m
Фасовки, е.а.10005000500
Концентрация, е.а./мл100001000010000
Цена, руб1156.44625.6413

Сайт узнавания
ATTAAT
TAATTA
ИсточникИз штамма E.coli несущего клонированный ген VspI из Vibrio species 343
Субстрат для определения активностиДНК фага лямбда
Единица активностиЗа единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Оптимальный SE-буферW (10 mM Tris-HCl (pH 8.5 при 25°C); 10 mM MgCl2; 100 mM NaCl; 1 mM DTT.)
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
BGOWYRose
0 - 1010 - 2550 - 7510025 - 5050
Оптимальная температура
37oC
Условия хранения10 mM Tris-HCl (pH 7.6); 50 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 200 μg/ml BSA; 1 mM DTT; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Срок хранения фермента 1 год с даты проверки, указанной на фасовке
ЛигированиеПосле гидролиза 10-кратным избытком фермента 70% фрагментов ДНК сшиваются ДНК лигазой и 90% из них могут быть повторно расщеплены. В присутствии 10% ПЭГ сшивка проходит лучше.
Неспецифический гидролизКартина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С
Чувствительность к метилированиюБлокируется метилированием ATTAmAT.
Инактивация 20 мин при
65oC
ПримечаниеС ферментом поставляется 10 Х SE-буфер W.
Литература:Дегтярев С.Х., Репин В.E., Речкунова Н.И., Чижиков В.E., Малыгин E.Г., Михайлов В.В., Рассказов В.A. Биоорг. Хим. 13: 420-421 (1987).
Degtyarev S. Kh., Prikhod`ko E.A., Rechkunova N.I., Gorbunov. Yu. A. Interaction of Vsp I and Tru9 I restriction endonuclease with synthetic oligonucleotides. // Biochimica et Biophysica Acta, 1172, 89-94 (1993).
 В.А. Чернухин, М.А. Абдурашитов, В.Н. Томилов, Д.А. Гончар, С.Х. Дегтярев Сравнительный рестрикционный анализ хромосомной ДНК крысы in vitro и in silico // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю. А. Овчинникова, 2006, т. 2, №3, с. 39-46

Построить диаграмму расщепления участка ДНК по Вашему выбору с помощью данной эндонуклеазы рестрикции.
Введите в окно справа последовательность, состоящую из литер A, G, T, C и N длиной не менее 50 и не более 50 тысяч символов и нажмите кнопку Отправить

Теоретические электрофореграммы разделения фрагментов ДНК в 1%-ном агарозном геле 1хТБЕ для наиболее популярных плазмидных и вирусных ДНК:

Для просмотра длин фрагментов наведите курсор на дорожку. Вы можете скопировать данные, если необходимо, из всплывающего окна
Длины фрагментов на дорожке
M12345M

M - маркер, 1 - ДНК аденовируса-2, 2 - ДНК фага Лямбда, 3 - ДНК фага T7, 4 - pUC19, 5 - pBR322