| Сайт узнавания | GACN↑NNGTC CTGNN↓NCAG |
| Источник | Из штамма E.coli несущего клонированный ген Tth111 I из Thermus Thermophilus 111 |
| Субстрат для определения активности | ДНК фага лямбда (HindIII-digest) |
| Единица активности | За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (HindIII-digest) за 1 час при 65°С в 50 мкл реакционной смеси. |
| Оптимальный SE-буфер | Y (33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT.) |
| Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: | | B | G | O | W | Y | R | | 75 - 100 | 50 - 75 | 10 - 25 | 10 - 25 | 100 | 100 |
|
| Оптимальная температура | 65oC |
| Условия хранения | 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 500 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 1 mM DTT; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Срок хранения фермента 1 год с даты проверки, указанной на фасовке |
| Лигирование | После гидролиза 2-кратным избытком фермента 10% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой. |
| Неспецифический гидролиз | Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК
5 ед фермента в течение 16 часов при 65°С. |
| Чувствительность к метилированию | не проверялось |
| Инактивация 20 мин при | 80oC |
| Примечание | Большой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности.
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер Y. |
| Литература: | Shinomiya, T., Sato, S. Nucleic Acids Res. 8: 43-56 (1980).
|