| Сайт узнавания | CCCAG↑C
G↓GGTCG |
| Источник | Geobacillus stearothermophilus Y |
| Субстрат для определения активности | ДНК фага лямбда |
| Единица активности | За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 70°С в 50 мкл реакционной смеси. |
| Оптимальный SE-буфер | W (10 mM Tris-HCl (pH 8.5 при 25°C); 10 mM MgCl2; 100 mM NaCl; 1 mM DTT.) + BSA |
| Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: | | B | G | O | W | Y | Rose | | 10 - 25 | 25 - 50 | 75 - 100 | 100 | 75 - 100 | 100 |
|
| Оптимальная температура | 70oC |
| Условия хранения | 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°C.
Срок хранения фермента 1 год с даты проверки, указанной на фасовке |
| Лигирование | После гидролиза 20-кратным избытком фермента около 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. |
| Неспецифический гидролиз | Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 70°С. |
| Чувствительность к метилированию | не проверялось |
| Инактивация 20 мин | Нет |
| Примечание | Для достижения 100% активности следует добавлять BSA в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл.
С ферментом поставляется 10 Х SE-буфер W, BSA. |
| Литература: | Дедков В.С., Михненкова Н.А., Килева Е.В., Тарасова Г.В., Гончар Д.А., Акишев А.Г., Чернухин В.А., Шкиря С.С., Дегтярев С.Х.
Новая эндонуклеаза рестрикции GsaI, неошизомер фермента BseY I, узнает последовательность ДНК 5’-CCCAGC(-1/-5)-3’. // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю.А.Овчинникова, Т4, №1, С. 19-24 (2008).
|
Построить диаграмму расщепления участка ДНК по Вашему выбору с помощью данной эндонуклеазы рестрикции.
Введите в окно справа последовательность, состоящую из литер A, G, T, C и N длиной не менее 50 и не более 50 тысяч символов и нажмите кнопку Отправить | |
Теоретические электрофореграммы разделения фрагментов ДНК в 1%-ном агарозном геле 1хТБЕ для наиболее популярных плазмидных и вирусных ДНК:
Для просмотра длин фрагментов наведите курсор на дорожку. Вы можете скопировать данные, если необходимо, из всплывающего окнаДлины фрагментов на дорожке |
M - маркер, 1 - ДНК аденовируса-2, 2 - ДНК фага Лямбда, 3 - ДНК фага T7, 4 - pUC19, 5 - pBR322
|